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尿素氮(BUN)試劑盒操作說明書
點擊次數(shù):2271 更新時間:2021-05-25

尿素氮(BUN)試劑盒說明書

微量法

注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義

尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物,在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。

測定原理

在堿性條件下,尿酶水解尿素產(chǎn)生氨,氨與次氯酸反應(yīng)生成氯胺,再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚,在 630nm 處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、常溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制

標(biāo)準(zhǔn)品:液體 1mL×1 支,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,4℃避光保存,臨用前加 4mL 蒸餾水充分溶解。

試劑二:液體 8mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體 8mL×1 瓶,4℃避光保存。

樣品處理

1. 組織:按照質(zhì)量g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,勻漿后于25℃,10000g 離心10min,取上清待測。

2. 細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量104:蒸餾水體積mL)為500~1000:1的比例建議500萬細(xì)胞加入1mL蒸餾水),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min); 然后 4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。

3. 血清或其它液體:直接檢測。

測定操作

 

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

測定管

樣品(μL)

 

 

20

標(biāo)準(zhǔn)品(μL)

 

20

 

H 2 O(μL)

20

 

 

試劑一(μL)

40

40

40

充分混勻,于 37℃反應(yīng) 10min

試劑二(mL)

70

70

70

試劑三(mL)

70

70

70

充分混勻,于37℃顯色10min,于微量石英比色皿/96孔板,雙蒸水調(diào)零,測定630nm處吸光值,

記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管和A測定管

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次

 

計算公式

1. 按樣本質(zhì)量計算

尿素氮含量(mg/g)=(A測定管- A空白管) ÷(A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管)×C 標(biāo)準(zhǔn)品÷W= 0.005×(A測定管- A空白管) ÷(A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管)÷W

2. 按細(xì)胞數(shù)量計算

尿素氮含量(mg/104cell)=(A測定管- A空白管) ÷(A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管)×C標(biāo)準(zhǔn)品÷細(xì)胞數(shù)量= 0.005×(A測定管- A空白管) ÷(A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管)÷細(xì)胞數(shù)量

3. 按液體體積計算

尿素氮含量(mg/L)=(A測定管- A空白管) ÷(A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管)×C 標(biāo)準(zhǔn)品=5×(A測定管- A空白管) ÷(A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管)

C 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度,5mg/L;W:樣品質(zhì)量,g

注意事項

1. 配制好的試劑一在2-8℃條件下可保存一周。

2. 最di檢出限為80μg/L。

 

實驗代做服務(wù):

 

免疫組化IHC染色實驗服務(wù)

細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務(wù)

試劑盒免費代檢測

實驗室代做實驗項目

 

透射電鏡服務(wù)實驗服務(wù)

石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實驗服務(wù)

免疫共沉淀(CHIRP)實驗

RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實驗代做

酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù)

雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

喹諾酮類快速檢測試劑盒

組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)

 

染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務(wù)

 

多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實驗

免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實驗服務(wù)

ATP/ADP檢測實驗服務(wù)

蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務(wù)

蛋白相互作用分析

堿性磷酸酶染色實驗服務(wù)

PKC活性檢測實驗

非標(biāo)定量實驗

(Label-free)

 

DIGE技術(shù)實驗服務(wù)

端粒酶活性檢測實驗

細(xì)胞生長曲線的測定

掃描電鏡服務(wù)

NF-KB p65活性檢測實驗

 

慢病毒包裝實驗服務(wù)

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

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